熒光原位雜交技術(shù)fish檢測(cè)標(biāo)記染料的種類
熒光標(biāo)記的發(fā)展已經(jīng)有了一段時(shí)間,但這門技術(shù)已經(jīng)分支出了許多技術(shù),已經(jīng)應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域中。熒光原位雜交技術(shù)fish檢測(cè)是一種非放射性分子遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。該技術(shù)不但可用于已知基因或序列的染色體定位,而且也可用于未克隆基因或遺傳標(biāo)記及染色體畸變的研究。在基因定性、定量、整合、表達(dá)等方面的研究中頗具優(yōu)勢(shì)。
通過(guò)標(biāo)記同一DNA鏈與不同種必細(xì)胞的染色體雜交,可以找出不同種屬之間的同源基因以及基因在染色休上的位置,從而了解種屬之間的進(jìn)化關(guān)系。
熒光標(biāo)記染料的種類:
1.熒光素類染料
熒光素類標(biāo)記試劑包括標(biāo)準(zhǔn)熒光素及其衍生物,如異硫氰酸熒光素(FITC)、羥基熒光素(FAM)、四氯熒光素(TET)等。熒光素異硫氰酸酯(FITC)是一種常用的熒光染料。本文考察了FITC與殼聚糖氨基反應(yīng)時(shí),溶液pH值、FITC溶劑以及溫度對(duì)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)的影響,以期建立一種快速、穩(wěn)定的制備熒光標(biāo)記殼聚糖的方法。
2.羅丹明類染料
羅丹明類染料(rhodamine dye)是生物技術(shù)中常用的蛋白質(zhì)分析染料之一,主要包括R101、四乙基羅丹明(RB200)和羧基四甲基羅丹明(TAMRA)等。與熒光素類衍生物相比,羅丹明類具有更強(qiáng)的光穩(wěn)定性、更高的熒光產(chǎn)量和更低的pH敏感性。
3.菁染料
目前研究比較活躍的標(biāo)記菁染料主要有兩類,一類是噻唑橙(thiazole orange,TO)、噁唑橙(oxazole orange,YO)系列及其二聚體染料,另一類是多甲川系列菁染料。
4.其他熒光染料
二苯乙烯、萘酰亞胺、香豆素類、吖啶類、芘類等。